How to culture pluripotent stem cells in suspension: Passaging of PSC cultures in suspension
3-Second Blueprint (English)
- Passage PSC spheroids before reaching 400 µm (around days 4–5) to prevent necrotic cores and loss of pluripotency.
- Centrifuge at 200 × g, dissociate in 37°C Accutase for 10–15 min, then gently triturate 5–7 times with a P1000 pipette.
- Inactivate Accutase 3:1 with medium and reseed 100k–150k cells/mL with 10 µM Y-27632 on a CO2-resistant orbital shaker.
PSC Suspension CultureAccutase DissociationY-27632 ROCK InhibitorOrbital Shaker
3-Sekunden-Fazit (Deutsch)
- PSC-Sphäroide vor 400 µm Größe (Tag 4–5) passagieren, um nekrotische Kerne und Pluripotenzverlust zu verhindern.
- Bei 200 × g zentrifugieren, 10–15 Min. in 37 °C Accutase dissoziieren und 5–7-mal sanft mit einer P1000 triturieren.
- Accutase 3:1 mit Medium inaktivieren und 100k–150k Zellen/mL mit 10 µM Y-27632 auf einem CO2-Orbitalshaker aussäen.
PSC-SuspensionskulturAccutase-DissoziationY-27632 ROCK-InhibitorOrbitalschüttler
Note / Hinweis: Blueprints are AI-generated educational summaries (0% Politics · 0% Religion · 0% Brainrot) and do not constitute medical, legal, or financial advice. / KI-generierte Zusammenfassung zu Bildungszwecken – ersetzt keine medizinische, rechtliche oder finanzielle Fachberatung.